目前想要了解河流、湖泊、水库等地表水是否富营养化,除了可以通过检测水中的磷、氮等营养物质的含量进行判断,也可以通过观测水中藻类的繁殖情况判断,其中水质叶绿素a就是一个重要的指标。今天小编主要介绍一下水质叶绿素a检测样品保存和制备要求及方法。
水质叶绿素a检测样品保存要求:
水质叶绿素a检测样品采集后应在0℃~4℃避光保存、运输,24h 内运送至检测实验室过滤(若样品24h内不能送达检测实验室,应现场过滤,滤膜避光冷冻运输),样品滤膜于-20℃避光保存,14d 内分析完毕。需要注意的是,样品采集后,如条件允许,宜尽快分析完毕。
水体叶绿素a检测试样的制备:
1.过滤
在过滤装置上装好玻璃纤维膜根据水体的营养状态确定取样体积,用量简量取一定体积的混匀样品,进行过滤,最后用少量蒸馏水冲洗滤器壁。过滤时负压不超过 50kPa,在样品刚刚完全通过滤膜时结束抽滤,用镊子将滤膜取出,将有样品的一面对折,用滤纸吸干滤膜水分。仅当富营养化水体的样品无法通过玻璃纤维滤膜时,可采用离心法浓缩样品,但转移过程中应保证提取效率,避免叶绿素a的损失及水分对两朗溶液浓度的影响。
2.研磨
将样品滤膜放置于研磨装置中,加入3ml—4ml 丙酮溶液 ,研磨至糊状补加3ml—4ml 内酮溶液 ,继续研磨,并重复 1~2 次,保证充分研磨5min以上。将完全破碎后的细胞提取液转移至玻璃刻度离心管中,用内酮液冲洗研及研磨杵,一并转入离心管中,定容至10ml。叶绿素a对光及酸性物质敏感,实验室光线应尽量微弱,能进行分析操作即可,所有器皿不能用酸没泡或洗涤。
3.浸泡提取
将离心管中的研磨提取液充分振荡混匀后,用铝箔包好,放置于 4℃避光浸泡提取 2h以上,不超过 24h。在浸泡过程中要颠倒摇匀 2~3 次。
4.离心
将离心管放入离心机,以相对离心力 1000×g(转速 3000r/min~4000 r/min)离心10 min。然后用针式器过滤上清液得到叶绿素a的丙酮提取液 (试样)待测。